一、 相位差金相試樣切割機(jī)（phase-contrastmicroscope）
利用相位差金相試樣切割機(jī)，觀察給藥前后上海金相切割機(jī)型態(tài)，以了解上海金相切割機(jī)經(jīng)藥物處理后
型態(tài)的變化，評(píng)估藥物對(duì)上海金相切割機(jī)狀態(tài)的影響。
二、 上海金相切割機(jī)存活率之測(cè)定：MTT 還原分析法（3-（4,5-dimethylthianol-2-yl）-2,5
diphenyltetrazolium bromide reduction assay）

一、原理
正常健康的上海金相切割機(jī)，其上海金相切割機(jī)粒腺體內(nèi)膜的琥珀酸去氫醣（succinate
dehydrogenase）具有將 MTT（黃色）還原為 MTT-formazan（紫色）的能
力。而紫色顏色的深淺程度可代表還原能力的強(qiáng)弱，即琥珀去氫醣的活性，同時(shí)也反應(yīng)粒腺體的生理狀況。
由于粒腺體是上海金相切割機(jī)內(nèi)對(duì)環(huán)境因素最為敏感，因此粒腺體的生理狀況可代表上海金相切割機(jī)的生理狀況。當(dāng)還原能力強(qiáng)時(shí)，表示克氏循（Kreb’s cycle）環(huán)進(jìn)行速率快，可產(chǎn)生較多的能量供上海金相切割機(jī)使用，故可代表上海金相切割機(jī)的健康情形
良好

二、試劑
1. 5mg/ml MTT 溶液（溶劑：1X PBS），避光 4℃保存。
2. Dimethyl sulfoxide（DMSO）：Sigama

三、
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 每孔留下 350μl 的留胞培養(yǎng)液，加入 35μl MTT 溶液（黃色），避
光并靜置室溫下反應(yīng) 1 小時(shí)。
2. 移除含有 MTT 的上海金相切割機(jī)培養(yǎng)液，加入 350μl DMSO 以溶解紫色顆粒。
待紫色顆粒完全溶解后，每孔各取 125μl 的紫色溶液置入 96-well
RIA/EIA plate 中，設(shè)定波長(zhǎng)為 570 nm（630 nm 當(dāng)作參考波長(zhǎng)），測(cè)其
吸光值。吸光值越高，表示 MTT-formazan 產(chǎn)量越高，即代表上海金相切割機(jī)之
存活率越高。
3. 計(jì)算金相切割機(jī)存活率＝樣品吸光值 / 控制組吸光值 × 100﹪

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